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植物的組織培養(yǎng)技術(shù)

更新時(shí)間:2016/8/23 14:41:00  手機(jī)版

  植物組織培養(yǎng)技術(shù):

  1、植物組織培養(yǎng)過(guò)程:

 。1)原理:植物細(xì)胞具有全能性。

 。2)過(guò)程:

  2、用途:

  (1)微型繁殖

  微型繁殖就是用于快速繁殖優(yōu)良品神的植物組織培養(yǎng)技術(shù),也叫快速繁殖技術(shù)。繁殖過(guò)程中的分裂方式是有絲分裂,親、子代細(xì)胞內(nèi)DNA不變,所以能夠保證親、子代遺傳特性不變。

  (2)作物脫毒

  作物脫毒是利用莖尖、根尖等無(wú)毒組織,進(jìn)行微型繁殖,所獲幼苗是無(wú)毒的。

  (3)人工種子:通過(guò)組織培養(yǎng)技術(shù),可把植物組織的細(xì)胞培養(yǎng)成在形態(tài)及生理上與天然種子胚相似的胚狀體,也叫作體細(xì)胞胚。這種體細(xì)胞胚有于葉、根、莖分生組織的結(jié)構(gòu)。科學(xué)家把體細(xì)胞胚包埋在膠囊內(nèi)形成球狀結(jié)構(gòu),使其具備種子機(jī)能。所以,人工種子是一種人工制造的代替天然種子的顆粒體,可以直接播種于田間。

 、僦谱鞣椒ǎ喝斯しN子是利用植物組織培養(yǎng)獲得胚狀體、不定芽、頂芽和腋芽等,然后包上人丁種皮就形成了人工種子,如圖:

  ②優(yōu)點(diǎn):可使在自然條件下不結(jié)實(shí)或種子昂貴的植物得以繁殖;保持親本的優(yōu)良性狀,因該過(guò)程為無(wú)性繁殖;節(jié)約糧食,減少種子的使用;可以控制添加一些物質(zhì),如除草劑、農(nóng)藥、促進(jìn)生長(zhǎng)的激素、有益菌等。 周期短,易儲(chǔ)存和運(yùn)輸,不受氣候和地域的限制。

  (4)細(xì)胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn):從人工培養(yǎng)的愈傷組織細(xì)胞中提取某種成分,如紫草素、香料等。

  知識(shí)點(diǎn)撥:

  1、植物組織培養(yǎng)的注意事項(xiàng):

  (1)接種時(shí)應(yīng)注意的事項(xiàng):①接種室要消毒;②無(wú)菌操作;③接種時(shí)要防止交叉污染;④接種完立刻蓋好瓶口。

 。2)外植體接種前,需要將接種室、接種箱滅菌和對(duì)外植體消毒的操作:

 、俳臃N前一天,將接種室的四個(gè)角落用甲醛溶液和高錳酸鉀熏蒸。

 、诮臃N前1小時(shí),在接種室內(nèi)用噴霧器噴灑來(lái)蘇水;桌椅也用來(lái)蘇水擦拭;接種箱內(nèi)用甲醛溶液和高錳酸鉀熏蒸。

 、蹖缇液徒臃N箱內(nèi)用紫外燈滅菌。

  ④接種前,操作者用肥皂清洗雙手,擦干,再用酒精棉球擦拭雙手。

  ⑤用次氯酸鈉溶液將外植體消毒。

  2、在離體的植物器官、組織或細(xì)胞脫分化形成愈傷組織的過(guò)程中,需要的條件:①消毒滅菌;②一定濃度的植物激素;③適宜的溫度;④充足的養(yǎng)料。

  3、影響植物組織培養(yǎng)的因素:①培養(yǎng)基配制;②外植體選取;③激素的運(yùn)用;④消毒;⑤溫度、pH、光照。

  4、植物組織培養(yǎng)中植物激素使用:物組織培養(yǎng)中關(guān)鍵性激素是生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素;同時(shí)使用生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素時(shí),兩者用量的比例影響植物細(xì)胞的發(fā)育方向;先使用細(xì)胞分裂素,后使用生長(zhǎng)素,細(xì)胞既分裂5、植物組織培養(yǎng)過(guò)程中分化成的幼苗需要移栽,移栽時(shí),應(yīng)先將培養(yǎng)瓶的封口膜打開(kāi)一段時(shí)間,讓試管苗在培養(yǎng)間生長(zhǎng)幾日;移栽時(shí)需用流水清洗根部的培養(yǎng)基;最后幼苗需移植到消過(guò)毒的新環(huán)境下生活一段時(shí)間,等幼苗長(zhǎng)壯后再移栽到土壤中。

  知識(shí)拓展:

  1、植物細(xì)胞的全能性

  (1)概念:具有某種生物全部遺傳信息的任何一個(gè)細(xì)胞,都具有發(fā)育成完整生物體的潛能。

  (2)原理:細(xì)胞內(nèi)含有本物種的全部遺傳信息。

  (3)全能性表達(dá)條件:具有完整的細(xì)胞結(jié)構(gòu),處于離體狀態(tài),提供一定的營(yíng)養(yǎng)、激素和其他適宜外界條件。

  2、作物新品種培育

 。1)單倍體育種:

  ①過(guò)程:植株(AaBb)通過(guò)減數(shù)分裂得到花粉(AB、Ab、aB、ab四種類型);對(duì)花粉進(jìn)行花藥離體培養(yǎng)(技術(shù)是植物組織培養(yǎng));得到單倍體植株;對(duì)其幼苗時(shí)期進(jìn)行秋水仙素處理;得到了正常的純合二倍體植株(AABB、Aabb、aaBB、aabb四種類型)。

  ②優(yōu)點(diǎn):明顯縮短育種年限

 。2)突變體利用:在組織培養(yǎng)中會(huì)出現(xiàn)突變體,通過(guò)從有用的突變體中選育出新品種(如篩選抗病、抗鹽、含高蛋白的突變體)

  3、細(xì)胞產(chǎn)物的生產(chǎn):通過(guò)能夠產(chǎn)生對(duì)人們有利的產(chǎn)物的細(xì)胞進(jìn)行組織培養(yǎng),從而讓它們能夠產(chǎn)生大量的細(xì)胞產(chǎn)物。地位:是培育轉(zhuǎn)基因植物、植物體細(xì)胞雜交培育植物新品種的最后一道工序。

  4、植物組織培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn):

 、俨皇苌L(zhǎng)季節(jié)限制地繁殖植物。

  ②不攜帶病毒。

 、叟囵B(yǎng)周期短。

 、芸捎媒M培中的愈傷組織制取特殊的生化制品。

  ⑤可短時(shí)間大量繁殖,用于拯救瀕危植物。

 、蘅烧T導(dǎo)之分化成需要的器官,如根和芽。

 、呓鉀Q有些植物產(chǎn)種子少或無(wú)的難題。如將香蕉進(jìn)行組培得到人工種以方便移種。

  5、培養(yǎng)基的制作:制備MS固體培養(yǎng)基→外植體消毒→接種→培養(yǎng)→移栽→栽培。肉湯培養(yǎng)基以有機(jī)營(yíng)養(yǎng)為主,MS培養(yǎng)基則需提供大量無(wú)機(jī)營(yíng)養(yǎng)。制備MS固體培養(yǎng)基操作過(guò)程:配制母液時(shí),無(wú)機(jī)物中大量元素濃縮10倍,微量元素濃縮100倍;激素類、維生索類以及用量較小的有機(jī)物一般可按1mg/mL的質(zhì)量濃度單獨(dú)配制成母液;將分裝好的培養(yǎng)基連同其他器械一起進(jìn)行高壓蒸汽滅菌。

  6、消毒和滅菌:外植體可以用酒精消毒;操作前手需用酒精消毒;培養(yǎng)基需用高壓蒸汽滅菌。

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